一、核心需求指标

1. 洁净度分级：

◦ 试剂配制 / 分装区：万级（ISO 8 级），≥0.5μm 粒子≤352000 粒 /m³，微生物≤100CFU/m³

◦ 核酸提取 / 扩增区：十万级（ISO 9 级），且需负压（相对于相邻区域 - 5Pa），避免气溶胶扩散

◦ 无菌检验区：万级背景下局部百级（生物安全柜内，ISO 5 级）

1. 环境参数控制：

◦ 温度：试剂生产区 20±1℃（酶制剂对温度敏感，波动超 ±1℃易失活），冷链存储区 2-8℃

◦ 相对湿度：40±5%（湿度低于 35% 易产生静电，高于 45% 导致试剂吸潮）

◦ 新风量：≥40m³/（h・人），核酸扩增区排风次数≥20 次 /h（强制外排，避免回风污染）

1. 特殊工艺要求：

◦ 核酸相关区域需配备 “空气阻断 + UV 光解” 双重消毒系统，防止核酸残留（残留量≤10pg/m³）

◦ 试剂分装线需配套无菌隔离器（ISO 5 级），避免人员直接接触

◦ 所有与试剂接触的管道、容器需采用 316L 不锈钢（内壁电解抛光，Ra≤0.4μm），符合 GMP 对材质的要求

二、净化系统解决方案

（一）车间布局规划（总面积 1000㎡）

（二）核心技术亮点

1. 核酸污染防控系统：

◦ 核酸区域采用 “三区两缓” 布局（试剂准备区→缓冲间→提取区→缓冲间→扩增区），每个缓冲间设互锁门 + UV 消毒（照射时间≥30min）；

◦ 排风系统配备高效过滤器（H14）+ 核酸酶喷雾装置，排风经处理后排放（核酸残留检测阴性），避免对外环境污染。

1. 精准温湿度控制系统：

◦ 采用 “集中空调 + 分区末端” 设计，万级区配置 4 台恒温恒湿机组（制冷量 45kW，制热量 30kW），通过 PID 算法控制表冷器与加湿器，温湿度控制精度达 ±0.5℃/±2%；

◦ 冷链存储区采用双回路制冷系统，断电后可通过备用蓄电池维持 8h 低温（温度≤8℃），满足试剂存储应急需求。

1. 材料与防交叉污染设计：

◦ 墙面 / 吊顶采用 50mm 厚彩钢板（抗菌涂层，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌抑菌率≥99%），接缝处用食品级硅酮胶密封；

◦ 地面采用 PVC 卷材（防静电 + 防腐蚀，耐酸碱试剂侵蚀），分区设置独立地漏（带水封 + UV 消毒，避免异味与微生物滋生）；

◦ 不同功能区之间采用实体墙分隔，避免空气串流，门体采用电动平移门（带互锁，防止同时开启）。

三、施工与验证要点

1. 洁净施工管控：

◦ 核酸区域施工优先采用 “无尘化作业”，施工人员需穿戴一次性无菌服 + 鞋套，工具使用前经 75% 乙醇消毒；

◦ 管道焊接采用全自动轨道焊机（316L 不锈钢），焊口经 X 光探伤检测（无裂纹、气孔），内壁粗糙度经激光测量仪验证（Ra≤0.4μm）；

◦ 洁净区地面施工后，进行防静电测试（表面电阻 10⁶-10⁹Ω）与防渗漏测试（注水 24h 无渗漏）。

1. 专项验证方案：

◦ 核酸污染验证：在扩增区释放 10⁴pg/mL 的新冠病毒核酸气溶胶，运行消毒系统后，采用 RT-PCR 检测环境表面与空气，结果均为阴性；

◦ 温湿度稳定性验证：连续监测 30 天，万级区温度波动≤±0.8℃，湿度波动≤±3%，冷链区温度稳定在 4±2℃；

◦ 无菌验证：在分装隔离器内放置无菌培养基，运行 24h 后培养，无微生物生长（符合无菌要求）。

四、项目成效

1. 合规性达标：

◦ 改造后 3 个月通过 NMPA 体外诊断试剂生产现场核查，获得《医疗器械生产许可证》；

◦ 顺利通过 ISO 13485 质量管理体系认证，核酸检测试剂获得欧盟 CE 认证（符合 IVDR 法规要求）。

1. 生产质量提升：

◦ 试剂批次合格率从改造前的 88% 提升至 99.7%，未再发生核酸交叉污染导致的假阳性问题；

◦ 试剂有效期从 12 个月延长至 18 个月（温湿度稳定控制减少酶制剂失活），年减少报废损失约 210 万元。

1. 运营效率优化：

◦ 采用变频排风风机 + 热回收装置，车间能耗降低 18%（年节省电费约 35 万元）；

◦ 建立环境监控云平台，实时监测 156 个点位（温湿度、压差、核酸残留），异常时自动报警，响应时间≤3 分钟。

五、运维要点

1. 定期维护计划：

◦ 初效过滤器（G4）每月更换 1 次，中效过滤器（F8）每 2 个月更换 1 次，高效过滤器（H14）每 6 个月进行完整性测试（PAO 法），阻力超初始值 20% 时更换；

◦ 核酸区域 UV 灯每季度检测辐照强度（≥70μW/cm²），生物安全柜每半年进行气流与无菌测试。

1. 日常管理要求：

◦ 人员进入洁净区前需进行核酸检测（阴性方可进入），避免人员携带污染；

◦ 每日生产结束后，核酸区域需用 1000mg/L 含氯消毒剂擦拭表面，并用核酸酶喷雾消毒（作用时间≥1h）；

每月对冷链存储区进行温度校准（采用经计量认证的温度计，误差≤±0.5℃）。